ENAGIS-MAY: an indirect agglutination assay to detect immunoglobulins against the Mayaro virus in whole blood / ENAGIS-MAY: uma proposta de ensaio de aglutinação indireta para detectar no sangue imunoglobulinas contra o vírus Mayaro

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

O vírus Mayaro (MAYV) foi isolado inicialmente em Trinidad em 1954. No Brasil foi isolado em 1955 durante surto ocorrido no estado do Pará. Surtos têm sido descritos nas regiões da floresta amazônica, no norte do Brasil, onde pode ser considerado endêmico, e cujo ecossistema tem sido profundamente perturbado. Os sintomas causados pela infecção do MAYV são semelhantes aos causados por várias arboviroses, entre elas a dengue. O objetivo deste trabalho foi a padronização de um ensaio de aglutinação indireta para a detecção de imunoglobulinas contra o vírus Mayaro a partir do sangue total (ENAGIS-MAY). Células VERO foram infectadas com MAYV (MOI 1) para a obtenção das proteínas virais, as quais foram acopladas covalentemente a microesferas de poliestireno carboxilmodificadas. Para o ensaio biológico foram utilizados oito camundongos (Mus muscullus) da linhagem Swiss, divididos em dois grupos. O grupo M foi infectado com MAYV e o grupo C foi inoculado com PBS pH 7,2. Após 30 dias, amostras de sangue foram coletadas e analisadas para a presença de anticorpos antimayaro. Cerca de 50μL de sangue de cada animal foram aplicados em discos de papel de filtro, e após secagem, eluídos com tampão borato 0,2M pH 8,5. O ENAGIS-MAY foi realizado com 10μL do eluído e 10μL do látex contendo proteínas virais, e após 5 min de incubação, a presença de aglutinação foi observada. As amostras do grupo M apresentaram títulos de 50, 100, 50 e 50 para M1, M2, M3 e M4, respectivamente. Todas as amostras do grupo C foram negativas. Títulos de anticorpos neutralizantes foram determinados para os dois grupos pelo ensaio de neutralização de placa em microcultura e utilizados como padrão para cálculo da sensibilidade (100%; I.C. 95%: 39,8-100,0) e especificidade (100%; I.C. 95%: 39,8-100,0) do ENAGIS-MAY. A análise pelo teste de Fisher indicou que os resultados entre os ensaios apresentam correlação significativa (p<0,05). Portanto é possível a utilização do ENAGIS- MAY para a detecção de anticorpos antimayaro a partir de amostras de sangue impregnadas em papel de filtro.

ASSUNTO(S)

aglutinação passiva diagnóstico diagnostic mayaro mayaro biologia geral passive agglutination

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