Estudo da composição da matriz extracelular de cinco regiões de cartilagem articular do joelho bovino

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DATA DE PUBLICAÇÃO

1996

RESUMO

Este trabalho teve por objetivo analisar os componentes da MEC da cartilagem articular bovina de diferentes regiões do joelho (FI, F2, F3, P e T) que suportam forças biomecânicas de diferentes intensidades. A análise das fendas artificiais demonstrou que as regiões apresentaram diferentes padrões para o direcionamento das fibras colagênicas na camada superficial da cartilagem. Apesar disso o conteúdo relativo de colágeno não apresentou diferença significativa. As extrações realizadas com Gu-HCI 4M solubilizaram conteúdos de proteínas e ácido urônico semelhantes em todas as regiões. A quantificação total de GAGs apresentou valores significativamente diferentes. F2, F3 e FI apresentaram os maiores valores e P e T os menores. Os extratos foram submetidos a ultracentrifugação com CsCI e obtidas quatro trações (DI, D2, D3 e D4). A quantificação de proteínas, mais abundante em D4, mostrou diferença significativa entre as regiões. F3, P e FI apresentaram os maiores valores e F2 e T, os menores. A quantificação de ácido urônico, mais abundante em DI, não apresentou diferença significativa. Para análise qualitativa dos PGs na fração DI utilizou-se cromatografia de gel filtração. Três populações de PGs foram isoladas. Os padrões de migração para moléculas de alto peso foram avaliados em gel de agarose-poliacrilamida e as de menor peso em SDS-PAGE. Entre os PGs detectados em SDS-PAGE, P foi a região com maior conteúdo e FI apresentou, somente a população de maior peso. Te F3 apresentaram o padrão de migração mais rápido e polidisperso e P, F2 e FI apresentaram padrões mais lentos. A dimensão dos GAGs dos PGs foram avaliados, em gel de poliacrilarnida com tampão barbital, após digestão com papaína. Duas populações de cadeias de GAGs foram encontradas ( 40 kDa e acima de 150 kDa). O emprego de Chase AC e posterior análise em gel de agarose-poliacrilarnida indicou a presença de CS como único GAG. Para análise qualitativa das populações de proteínas não-colagênicas, em D4, utilizou-se cromatografia de troca iônica com gradiente de NaCI (O - 1,5 M). Em todas as regiões não foi observado material catiôQÍco. O material foi eluído com a concentração de NaCI entre O - 0,6 M e as proteínas analisadas em SDS-P AGE. O Mr das moléculas observadas variou de 190 a 19 kDa e foi detectado fibromodulim em todas as regiões através da coloração CEC-azul de alcian e "immunoblotting". O fibromodulim (60 - 67 kDa) apresentou um comportamento de autoagregação, mais evidente em T e FI

ASSUNTO(S)

matriz extracelular biomecanica cartilagem

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