PurificaÃÃo e caracterizaÃÃo parcial de duas toxinas hemorrÃgicas da peÃonha de Jararaca malha-de-cascavel, Bothrops eryhromelas (Serpentes, Viperidae)

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2005

RESUMO

A espÃcie Bothrops erythromelas, conhecida em Pernambuco como jararaca malha-de-cascavel, està amplamente distribuÃda na RegiÃo Nordeste do Brasil. A hemorragia à um dos sintomas mais caracterÃsticos do envenenamento botrÃpico, especialmente em Pernambuco. A aÃÃo hemorrÃgica ocorre devido a um grupo de metaloproteÃnas zinco-dependentes, denominadas hemorraginas, que agem diretamente na parede dos vasos sanguÃneos, sendo divididas em 4 classes de acordo com a massa molecular. O objetivo deste trabalho foi purificar e caracterizar duas hemorraginas de alta massa molecular da peÃonha de Bothrops erythromelas (pBe). Para tanto, 865 mg de pBe foram aplicados em coluna de gel filtraÃÃo Sephacryl S-200 equilibrada com tampÃo acetato de amÃnio 50mM contendo 0,3 M de NaCl, pH 5,0, sendo as fraÃÃes analisadas quanto a intensidade de atividade hemorrÃgica em camundongos. A fraÃÃo com maior atividade foi aplicada em coluna Mono Q 5/50 equilibrada com tampÃo Tris-HCl 100mM, pH 8,0 e eluÃda em gradiente nÃo linear de NaCl 2M. Os tubos 9 e 18 provenientes da troca iÃnica foram recromatografados, separadamente, em coluna de gel filtraÃÃo TSK G-2000 SW equilibrada com tampÃo acetato de amÃnio 150 mM, pH 5,0. As toxinas purificadas tiveram sua massa molecular estimada em 55 KDa segundo EGPA-SDS em condiÃÃes redutoras e foram completamente inibidas por EDTA. Em conclusÃo, duas novas metaloproteinases hemorrÃgicas da classe P-III, denominadas berythrogina 1 e berythrogina 2, foram purificadas da peÃonha de Bothrops erythromelas

ASSUNTO(S)

purificaÃÃo toxinas hemorrÃgicas anatomia animal jararaca malha-de-cascavel

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