Recomendações para detecção de Leptospira em urina pela PCR
AUTOR(ES)
Lucchesi, Paula M.A., Arroyo, Guillermo H., Etcheverría, Analía I., Parma, Alberto E., Seijo, Alfredo C.
FONTE
Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical
DATA DE PUBLICAÇÃO
2004-03
RESUMO
No presente estudo, a PCR foi utilizada para detectar leptospiras em urina humana. Diversas abordagens para processamento de amostra foram avaliadas para otimizar a detecção de leptospiras em urina misturada com esta bactéria. Além disso, algumas mudanças na composição da mistura de reação foram analisadas. Não se observou amplificação em urina ácida, conseqüentemente, a neutralização da amostra imediatamente após a coleta é fortemente recomendada. PBS apresentou melhores resultados que Tris ou NaOH como reagentes neutralizadores. Congelamento e descongelamento de amostras antes do processamento produziram resultados negativos. Eliminação de células epiteliais, leucócitos e cristais por centrifugação a 3.000rpm, à temperatura ambiente, aumentou a sensibilidade. Ademais, ambas, a etapa de lavagem após a coleta de leptospiras por centrifugação e a inclusão de albumina de soro bovino a 0,1% na mistura de reação minimizaram a interferência de outros compostos inibidores. Essas modificações contribuíram para melhorar a detecção de Leptospira em urina através da PCR.
ASSUNTO(S)
leptospira pcr urina inibidores pcr humana
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